制作大型哺乳动物骨骼标本时,骨骼的清洗和脱脂是去除软组织、脂肪及杂质的关键步骤,直接影响标本的保存质量与外观。以下是详细的关键步骤及操作要点:
一、骨骼清洗过程
1. 初步去肉与软组织剥离
工具选择:
解剖刀、镊子、钢丝刷(粗硬毛)、高压水枪(可选)。
操作方法:
手工剥离:用解剖刀小心刮除骨骼表面残留的肌肉、肌腱及筋膜,避免损伤骨质。
昆虫辅助(可选):将骨骼置于密闭容器中,放入皮蠹幼虫(Dermestidae)等食腐昆虫,利用其啃食残留软组织(需严格隔离,防止昆虫逃逸)。
高压冲洗:用高压水枪冲洗骨骼缝隙,去除松散杂质。
注意事项:
关节处需重点清理,避免残留软组织腐败导致标本发臭。
2. 化学清洗
溶液配方:
酶解液:蛋白酶(如胰蛋白酶)1-2 g/L + 磷酸盐缓冲液(pH 7.2-7.6),用于分解残留蛋白质。
次氯酸钠溶液:0.5%-1%浓度,用于消毒及去除有机物。
操作步骤:
将骨骼浸泡于酶解液中,37℃恒温振荡24-48小时,定期更换溶液。
酶解后用清水冲洗,再浸入次氯酸钠溶液中消毒1-2小时。
用蒸馏水彻底冲洗,去除化学残留。
3. 顽固杂质处理
工具:超声波清洗机、细钢丝刷、牙科探针。
方法:
对颅骨等复杂结构,用超声波清洗机辅助去除微小杂质。
用牙科探针清理骨髓腔内的脂肪及血块。
二、骨骼脱脂过程
1. 脱脂原理
动物骨骼中残留的脂肪(如骨髓脂肪)易氧化导致标本发黄、变脆,需通过有机溶剂溶解并去除。
2. 常用脱脂溶剂及选择
丙酮 | 挥发性强、脱脂效率高,但成本较高 | 实验室短期处理小型骨骼 |
工业酒精(95%) | 成本低、易获取,但脱脂速度较慢 | 大型骨骼预脱脂或长期浸泡 |
乙醚-乙醇混合液 | 脱脂彻底,但乙醚易燃易爆,需严格防护 | 高价值标本的精细脱脂 |
汽油/煤油 | 传统脱脂剂,但毒性大、易残留 | 野外应急处理(不推荐长期使用) |
3. 脱脂操作步骤
预处理:
将清洗后的骨骼晾干或用吸水纸包裹,去除表面水分。
浸泡脱脂:
小型骨骼(如啮齿类):2-4周。
大型骨骼(如牛、马):3-6个月,甚至更久。
将骨骼完全浸没于脱脂溶剂中,密封容器,定期搅拌或更换溶剂。
时间控制:
检测脱脂效果:
随机抽取小块骨骼,用滤纸按压表面,无油渍渗出即为脱脂完成。
4. 脱脂后处理
冲洗:用蒸馏水或工业酒精冲洗骨骼,去除残留溶剂。
干燥:
自然风干:适用于小型骨骼,但易导致表面不平整。
低温烘干:将骨骼置于40-50℃烘箱中,定期翻动,避免局部过热。
临界点干燥(CO₂):保留骨骼微细结构,适用于科研标本。